一、病毒分離標本的採集與運送
1、採集
病毒分離成功的關鍵取決於採集標本的質量,及其保存運輸等環節。爲提高病毒的分離率,在發病早期,可每天採集1份咽拭子,採集多份痰液。
(1)鼻咽拭子:用棉籤擦拭雙側咽扁桃體及咽後壁,將棉籤頭浸入含4~5 ml樣本運輸液的螺口試管中,尾部棄去。
(2)痰液:讓病人將痰液咳入無菌平皿中,然後用棉籤刮取痰液放入含4~5 ml樣本運輸液的螺口試管中。
(3)嗽口液:用10ml洗液嗽口。
(4)屍檢標本:取肺、肝、腎、心、淋巴結、血凝塊等組織2釐米×2釐米大小,置於10螺口試管中。每種組織需要5~10管。
2、標本保存上送
標本採集後應立即冷凍保存,如未能及時接種應置-70℃或以下保存。常用的樣品運輸液爲:pH7.4~7.6的Hank's,Eagle's或水解乳蛋白液。
爲防止細菌和真菌生長,在採樣液中需加入青、鏈黴素,終濃度爲每毫升1000單位青黴素和100μg的鏈黴素,(也可用慶大黴素,其終濃度爲每毫升1mg,)同時加制黴菌素,終濃度爲每毫升4μg。
二、細菌培養標本的採集與運送
1、採集
細菌培養標本最好在抗感染治療之前採集,可採集咽拭子或痰液。
1)咽拭子:用無菌溼棉籤擦拭雙側咽扁桃體及咽後壁,再將棉籤放入無菌試管中。
2)痰液:讓病人直接將痰液咳入無菌平皿中。
2、保存運送
做細菌分離培養的樣本密封好常溫下2小時內送檢。
三、血清標本採集與運送
1、採集
須採集病例的急性期和恢復期血清:
1)儘早採集急性期血樣,最遲不晚於發病後7天。恢復期血樣則在發病後2~4周採集。
2)無菌採集5ml血液標本,分離血清,冷凍。
3)詳細登記有關病例的姓名、性別、年齡等基本信息,發病日期、採樣日期等。
2、運送保管
1)血清標本應帶冰在24小時內運送至實驗室。應分裝多管冷凍保存。
2)標本至實驗室後,病毒分離標本應儘快進行接種分離,48h內能進行接種的可置於4℃保存,如未能接種應置-70℃或以下保存。
3)血清標本可在4℃存放一週,長期保存置-20℃或以下。
四、實驗室安全指南
樣本檢驗採取就地檢驗的原則,當地醫院能開展的項目在當地檢測,同時將血清樣本和咽拭子等相關樣本送當地疾控中心檢驗。
病原分離檢測必須在II級生物安全實驗室內,嚴格按照無菌操作和生物安全防護原則進行。(來源:中國疾病預防控制中心)
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